- 转化医学以药物研发历程中生物标记物为焦点，以精准医疗提高药物研发临床应答率为目标，笼罩从早期靶点确认——临床前R&D ——临床I、II、III期Development，到上市后的药物检测，通过差别阶段的研究实现药物研发的闭环。
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- 04临床研究
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随着基因组学、卵白质组学和代谢组学等多组学剖析技术不绝地生长，治疗方法已经从古板小分子扩展到多肽、卵白、抗体、基因疗法、细胞疗法等多种新型技术。尽管有这些新技术，但仍有大宗疾病的致病原因还无法彻底明白。转化医学将生物医学视察和研究转化为改善健康的干预步伐的历程，加速了基础研究、新药开发的和临床转化的进程，成为精准靶向治疗的加速器。转化医学研究利用种种研究手段，确定靶点与疾病爆发生长的关系、验证和探索药物的作用机制、发明生物标记物并开发陪同诊断产品，以及为临床研究开展筛选最合适的人群和适应症等，从而提高新药研发效率和乐成率。
将转化医学里程碑叠加到药物开发阶段[1]庄闲官网请回覆：什么是转化医学
效劳平台
免疫组化技术平台- 免疫组化简介免疫组化，也称免疫组织化学技术(immunohistochemistry)或免疫细胞化学技术(immunocytochemistry)。是指应用免疫学基来源理即抗原与抗体特异性结合的原理，通过化学反应使标记抗体的显色剂显色来确定组织细胞内抗原（多肽和卵白质），对其进行定位、定性及相对定量的研究。凭据抗原抗体反应和化学显色的原理，组织切片或细胞样本中的抗原先和一抗结合，再利用一抗与二抗反应，DAB进行显色，进而进行剖析。主要办法组织处理、牢固、切片抗原修复除去内源性过氧化物酶关闭一抗、二抗孵育检测复染
- 组织处理、牢固、切片组织牢固可生存抗原，避免收罗的组织自溶和坏死。组织包埋可在切片历程中对组织提供支撑，使切片更坚实。
石蜡切片 冰冻切片 牢固 包埋前：甲醛 切片前或切片后：甲醛、甲醇、乙醇或丙酮 切片 切片机 冰冻切片机 贮存 室温下贮存多年 -80 °C下贮存1年 （-190°C下贮存时间更长） 优势 容易操作，不会损坏切片 ? 保存酶的功效和抗原性
? 实验流程简短（通常不需要冗长的牢固办法）
局限性 ? 太过牢固会掩盖抗原表位，进而增加抗原修复的需求
? 处理时间长：在梯度酒精和二甲苯中逐步脱水，以便于石蜡渗透。
? 如果没有快速冷冻组织”可能会形成冰晶，从而破坏组织结构
? 冰冻切片通常比石蜡切片厚，可能会导致区分率低、图像差
? 可能需要阻断内源活性酶。
石蜡切片 vs冰冻切片 - 处理流程
- 抗原修复对甲醛牢固的组织切片进行抗原修复，以袒露抗原位点，从而使抗体结合。
热诱导的抗原表位修复 卵白水解酶诱导的抗原表位修复 优势 抗原表位的修复更温和，参数更可控。 适用于较难修复的抗原表位。 ph值 通常使用pH6的缓冲液，但碱性缓冲液也在广泛使用。必须通过实验确定 pH值通常为7.4。 温度 约95°C。 通常为37°C 孵育时间 10-20分钟 10-15分钟 缓冲液组分 取决于靶抗原所需的pH 值。常用的缓冲液包括柠檬酸钠、EDTA和Tris-EDTA 酶(如胃卵白酶、卵白酶K 或胰卵白酶)的中性缓冲液。 注意事项 微波炉加热可能会导致抗原修复不均匀。剧烈欢喜会导致脱片(组织与载玻片疏散）。 酶修复有时会破坏切片的形态- 浓度和时间需要优化 抗原修复的主要要领 - 关闭用血清或BSA关闭，避免抗体的非特异性结合，并降低配景和潜在的假阳性结果。? 卵白关闭：使用血清或BSA 进行关闭关于避免抗体与组织或Fc 受体（与抗体恒定区（Fc）结合的受体）爆发非特异性结合至关重要。二抗种属来源的血清是很好的关闭试剂。使用牛血清白卵白（BSA）或酪卵白，可用于阻断非特异性抗体结合。? 生物素关闭：在使用基于亲和素/生物素的检测系统时，阻断内源性生物素，因为内源性生物素保存于许多组织中，特别是肾脏、脾脏、肝脏和大脑中。用亲和素与组织孵育，阻断内源生物素，然后用外源生物素孵育，以阻断亲和素分子上特另外生物素结合位点。
- 检测? 酶显色法：显色检测使用酶能够催化可溶性底物爆发有色沉淀。这些酶通常偶联在二抗上，也可以偶联在一抗上用于直接检测。最常用的酶有HRP 和AP，前者将DAB 转化成棕色产品，后者将3-氨基-9-乙基咔唑 (AEC) 转化成红色产品。显色检测通常比荧光检测更灵敏。别的，差别于荧光染料，有色沉淀物有光稳定性，因此染色切片能够生存多年。荧光检测需要使用专业荧光显微镜和滤光片，显色检测仅需使用标准显微镜。然而，显色检测的孵育和关闭办法比荧光法更多，时间也更长。? 荧光法：荧光检测（免疫荧光）是基于荧光基团被特定波长的光引发后发射波长较长的荧光的特性。荧光检测经常用于需要同时检测多种抗原的情况。荧光染料可以与一抗或二抗直接偶联，也可与链霉素亲和素偶联。
- 案例赏析：PD-L1, Ki-67, Her2, CD31, CD163, FoxP3
IHC Analysis of the expression ofa)PD-L1 from lung adenocarcinoma[3]; b)Ki-67 from periampullary tumors[4]; c)Her2 from lung tumor[5]; d)CD31 from human gastric adenocarcinoma[6]; e)CD163 (M2 TAM marker) from oral squamous cell carcinoma (OSCC)[7]; f)FoxP3 from human glioblastoma[8].
总结与展望- 基于基因组学、卵白组学、细胞组学及病理组学等综合性转化医学平台 ；高质量的研发治理团队 ；庄闲官网转化医学平台致力于为全球相助同伴提供全方位生物标记物发明、靶点验证、陪同诊断开发与商业化检测等一体化解决计划。? 以ELISA、ECL（MSD), SIMOA（HD-X), Biacore 8K 技术构建的的卵白质相互作用，卵白水平生物标记物平台 ；? 以流式细胞术（BD Symphony A3，BD Fortesssa, Beckman CytoFLEX S）为主构建的细胞水平生物标记物平台 ；? 以荧光定量PCR技术构建的多重核酸水平生物标记物平台 ；? 免疫组化（TAMs-IHC，FISH）技术构建的病理水平生物标记物平台等。
- 参考文献：[1] Hugues Dolgos, et al. Translational Medicine Guide transforms drug development processes: the recent Merck experience. Drug Discov Today. 2016 Mar;21(3):517-26. doi: 10.1016/j.drudis.2016.01.003.[2] Ying Xu, et al. A Selective Small-Molecule c-Myc Degrader Potently Regresses Lethal c-Myc Overexpressing Tumors. Adv Sci (Weinh). 2022 Mar;9(8):e2104344. doi: 10.1002/advs.202104344.[3] Jonas J Heymann, et al. PD-L1 expression in non-small cell lung carcinoma: Comparison among cytology, small biopsy, and surgical resection specimens. Cancer Cytopathol. 2017 Dec;125(12):896-907. doi: 10.1002/cncy.21937.[4] Mark M Aloysius, et al. Predictive value of tumor proliferative indices in periampullary cancers: Ki-67, mitotic activity index (MI) and volume corrected mitotic index (M/V) using tissue microarrays. World J Surg. 2010 Sep;34(9):2115-21. doi: 10.1007/s00268-010-0681-3.[5] Montse Verdu, et al. Cross-reactivity of EGFR mutation-specific immunohistochemistry assay in HER2-positive tumors. Appl Immunohistochem Mol Morphol. 2015 Sep;23(8):565-70.[6] Qingling Wang, et al. EPCR promotes MGC803 human gastric cancer cell tumor angiogenesis in vitro through activating ERK1/2 and AKT in a PAR1-dependent manner. Oncol Lett. 2018 Aug;16(2):1565-1570. doi: 10.3892/ol.2018.8869.[7] Faustino J Suárez-Sánchez, et al. Macrophages in Oral Carcinomas: Relationship with Cancer Stem Cell Markers and PD-L1 Expression. Cancers (Basel) (IF: 6.13; Q1). 2020 Jul 2;12(7):1764. doi: 10.3390/cancers12071764.[8] Qi Yue, et al. The prognostic value of Foxp3+ tumor-infiltrating lymphocytes in patients with glioblastoma. J Neurooncol. 2014 Jan;116(2):251-9. doi: 10.1007/s11060-013-1314-0. Epub 2013 Nov 26.[9] Christopher P Austin.Opportunities and challenges in translational science. Clin Transl Sci. 2021 Sep;14(5):1629-1647. doi: 10.1111/cts.13055.
